關於2024山東卷高考生物第5題(熒光探針)的分析

原題呈現


製備熒光標記的DNA探針時,需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大腸桿菌DNA聚合酶、擴增緩衝液、H2O和4種脫氧核苷酸(dCTP、dTTP、dGTP和鹼基被熒光標記的dATP)的反應管①~④中,分別加入如表所示的適量單鏈DNA。已知形成的雙鏈DNA區遵循鹼基互補配對原則,且在本實驗的溫度條件下不能產生小於9個連續鹼基對的雙鏈DNA區。能得到帶有熒光標記的DNA探針的反應管有
2024山東卷生物學T5
  A. ①②  B.②③  C. ①④  D. ③④

解析:關於該題的解讀非常多,答案也各種各樣。本人也從自我認知的角度對該題進行一下分析,歡迎各位師友討論。
    首先我們要明確題目給的一些信息:①合成熒光探針②只有A有熒光標記③該實驗溫度下不能產生少於9個鹼基對的雙鏈,根據表格我們繼續挖掘信息:④反應管裏有加雙鏈的(看起來好像局部互補,那麼信息③能不能用上?)也有加單鏈的(單鏈的如何形成探針呢?至少需要一個引物,那麼引物多大合適?是不是還和信息③有關?),同時,我們還需要注意到一個隱含條件,就是⑤添加的引物本身不含有熒光標記。至此,這道題就有眉目了。

    反應管①中的兩條DNA會發生互補,結果如下:
    互補鹼基對有10個,符合要求,但是以爲無法從3’向後繼續延伸(聚合酶無法催化從5'端向前的延伸),反應管①不行。
    反應管②是單鏈DNA,需要有引物輔助,又因爲不能產生少於9個鹼基對的引物,因此引物至少要有9個鹼基構成,且引物本身不含熒光標記,則引物爲 5’-GCCAATTCC…後面可以通過延申添加的序列是CTCT,不含熒光標記,②不行。
    反應管③也會發生配對,兩條單鏈進行配對結果如下:
   上鍊和下鏈分別向兩側延申均能加入熒光標記的A,③可以。
         反應管④依照②的思路,可以發現模板鏈末端仍然有兩個T,那麼在延申的過程中,一定會加入熒光標記的A,④正確。

答案D
(公衆號:try_newthing

 
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