代謝物差異結果有誰在?柱狀圖、 (O)PLS-DA得分圖、檢驗圖……


做代謝物差異分析時,總疑心結果文件是不是缺少了什麼?通常(O)PLS-DA分析輸出的圖包含差異代謝統計柱狀圖、(O)PLS-DA得分圖、模型檢驗圖等,對後續分析生物學意義、做更深入的研究有重要影響。

在使用Omicshare的(O)PLS-DA工具時常有同學問xx圖怎麼沒有?xx圖在哪個文件夾?xx的數據表沒找到?其實結果文件夾中有不少驚喜,想要的圖和數據基本都在!!一起回顧從數據整理到結果文件夾的“揭祕”~





數據整理



共有3個上傳文件,參照示例文件,代謝物定量表第一行爲樣本名,第一列爲代謝物ID,輸入代謝物定量數據,保存爲txt/csv/xls/xlsx格式均可;


分組文件第一列爲代謝物定量表的列名(樣本名),第二列爲自定義的分組名;即使沒有重複、一個樣本爲一組,也必須上傳分組文件;比較組文件一行爲一個比較組,第一列爲對照組,第二列爲處理組,運行時以第二列比上第一列;





參數選擇



共4個可選參數:差異檢驗方法、Pvalue閾值、VIP閾值、差異倍數值:

差異檢驗方法:可選PLS-DA偏最小二乘判別分析或OPLS-DA正交偏最小二乘判別分析,其中OPLS-DA解釋能力更強,可更準確地篩選出組間差異;
Pvalue:常用篩選閾值爲0.05、0.01、0.001;
VIP閾值:模型變量的變量權重值,常用篩選閾值爲VIP≥1;
差異倍數:即篩選代謝物定量值的差異倍數,默認1即不考慮差異倍數;

Tips:工具使用默認配色方案紅藍色,也可將矢量結果圖導入AI中修改配色

上傳文件完成參數預設即可提交任務。




結果文件指引



任務完成後在項目總覽處下載解壓結果文件。初級結果包含拓展名爲.OS的原始上傳數據、diff_stat.pdf/png的差異代謝物統計柱狀圖、diff_stat.xls的差異代謝物統計表、A-vs-B.tmp.Ttest.xls的單變量統計分析結果表;


打開“A-vs-B”的文件夾,大部分用得多的結果圖及數據表都在這個文件夾中:

A-vs-B.all.xls:差異代謝總表;
A-vs-B.filter.xls:顯著差異代謝物表;
A-vs-B.heatmap.pdf/png:顯著差異代謝熱圖;
A-vs-B.loading_plot.pdf/png:載荷圖;
A-vs-B.oplsda.pdf/png:OPLS-DA得分圖;
A-vs-B.pca.pdf/png:PCA得分圖;
A-vs-B.plsda.pdf/png:PLS-DA得分圖;
A-vs-B.permutation.pdf/png:OPLS-DA檢驗圖;
A-vs-B.xx.nosampleid.pdf/png:無名稱顯示的結果圖;
A-vs-B.vip.xls:VIP值表;


Tips:本示例選擇差異檢驗方法爲OPLS-DA檢驗,輸出結果包括PCA結果(圖+表)、PLS-DA結果(圖+表)與OPLS-DA結果(圖+表),若選擇PLS-DA檢驗則結果文件不含OPLS-DA結果;


更多詳細的使用說明、分析示例,可以在工具右側說明文檔中查看:



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