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爲了確保準確性和一致性，參與者被要求在進行研究之前，在鏡子或相機前練習每個定義的面部表情（即杜楚尼微笑和通過表現出壓抑的面部表情來激活降口角肌）。在研究過程中，每個面部表情都進行了三次，並記錄了顴大肌和降口角肌的運動單位動作電位（MUAP），並將其傳輸到EMG工作站（TrignoAvanti平臺，Delsys股份有限公司，Natick，MA，USA）。然後使用專有軟件（EMG works，Delsys股份有限公司，Natick，MA，USA）分析MUAP數據，如先前研究中所述。

研究中使用的EMG設備的技術規範見製造商提供的用戶手冊，標準化協議確保了所收集的數據的一致性和可靠性。

受試者的平均年齡爲37.82±8.7歲。在受試者中，右側和左側肌肉的測量值之間沒有發現統計學上的顯著差異，p≥0.356。在基線時，顴大肌和降口角肌的年齡和信號之間的雙變量相關性具有統計學意義，分別爲rp=-0.625和-0.620（p<0.001），而在隨訪時，降口角肌沒有發現顯著相關性，p=0.078。隨訪時，顴大肌的信號與年齡顯著相關，rp=-0.411，p=0.037。

基線時，顴大肌的激活導致平均水平皮膚位移3.16±0.9 mm，而隨訪時水平皮膚位移4.12±0.7 mm，p<0.001。面中部的垂直皮膚位移在基線時爲5.18±2.0mm，在隨訪時爲4.25±1.6mm，p=0.011。激活降口角肌後，基線時下表面的水平皮膚位移爲2.15±1.5mm，隨訪時爲2.05±1.6 mm，p=0.399。基線時皮膚垂直位移爲2.97±1.2 mm，隨訪時爲4.3±2.1 mm，p=0.002。（圖2-5）

本研究研究了注射前和注射後5天，戰略性注射的軟組織填充劑對面部肌肉（即顴大肌和降口角肌）的實際生物力學特性和肌肉收縮的影響，以及由此引起的皮膚表面變化（即面部中部和下面部的水平和垂直皮膚位移）。結果顯示，注射透明質酸基軟組織填充劑後，肌肉的強度（以μV爲單位）沒有顯著變化。然而，在基線和隨訪期間，顴大肌收縮後，皮膚的水平和垂直位移發生了顯著變化，平均水平皮膚位移從3.2 mm增加到4.1 mm，垂直皮膚位移從5.18 mm減少到4.25 mm。在降口角肌收縮後的水平皮膚位移沒有顯着變化（2.15 mm對2.05 mm），但垂直皮膚位移顯著增加，從2.9 mm增加到4.3 mm。（圖6-9）

這項初步研究提供了關於軟組織填充劑注射在面部肌肉附近對肌肉功能影響的重要新信息。肌電圖測量顯示，肌肉信號沒有實際增加或減少，這與肌肉力量直接相關。這表明肌肉本身的生理收縮特性並沒有改變。然而，注射後面部肌肉激活時產生的皮膚位移發生了顯著變化。值得注意的是，在顴大肌收縮時，測得的皮膚位移矢量的變化在水平方向上更大，在降口角肌收縮時在垂直方向上也更大，這似乎與它們各自纖維束的解剖方向相關。矢量是既有大小又有方向的數學對象。矢量的力是指其大小或在特定方向上施加的力的大小。當軟組織填充劑放置在肌肉上方或下方時，不會改變肌肉的力量。可測量的幅度保持不變，其產生的力保持不變。然而，肌肉收縮的矢量可能會發生不同的變化，這取決於什麼東西是放在它的上面還是下面，因爲與收縮相互作用的填充劑改變了力的方向。

這項研究的結果表明，將軟組織填充劑放置在肌肉附近可以改變肌肉的收縮矢量，因爲由此產生的水平和垂直皮膚位移在顴大肌收縮時發生變化，而由此產生的垂直位移在降口角肌收縮時發生變化。這強化了De Maio在2018年發表的第一篇提出的肌調的概念，即支持肌肉運動或阻斷肌肉過度活動。如果透明質酸注射在肌肉的表面，它可能會在收縮過程中與肌肉的擴張相互作用，從而潛在地影響力沿肌肉長度的分佈。然而，只要肌肉的方向不變，其力向量的方向將保持不變。肌肉由定向的肌肉纖維束組成，這些纖維束通過收縮和拉動其附着點來產生力。肌肉產生的力矢量的方向由肌肉纖維相對於其附着點（即原點和插入點）的方向決定。如果像HA填充劑庫這樣的外力矢量表面上施加到肌肉上，肌肉的形狀可能會改變，但肌肉纖維的方向和力矢量的方向通常會保持不變。如果外力矢量足夠強，可以改變肌肉纖維的方向，那麼理論上力矢量的方向也可能改變。

顴大肌和降口角肌是面部表情所必需的。顴大肌負責抬起嘴角以產生微笑，而壓低肌則向下拉動嘴角，產生負面表情或表達恐懼。在這項研究中，透明質酸填充劑被注射在顴大肌的頂部和降口角肌的下面。結果顯示肌電圖沒有變化，肌電圖測量肌肉在收縮過程中的電活動。這表明注射透明質酸填充劑不會影響肌肉收縮或產生力的能力。然而，注射後，顴大肌收縮時覆蓋皮膚的垂直和水平位移都延長了，我們測量到在降口角肌收縮時更大的垂直位移。這些發現表明，注射透明質酸基軟組織填充劑影響了力沿肌肉長度的分佈，並以本文前面描述的方式改變了肌肉纖維相對於其附着點的角度。總之，這項研究表明，注射透明質酸填充劑會影響力沿面部肌肉長度的分佈，並在特定情況下改變肌肉纖維相對於其附着點的角度，導致肌肉收縮過程中皮膚運動的變化（圖6-9）。

這種對錶情表達的影響程度將取決於各種因素，包括肌肉大小、肌肉位置、注射的透明質酸填充劑的數量和類型，以及患者面部肌肉和皮膚的個體特徵。因此，臨牀醫生在爲美容目的注射透明質酸填充劑時，仔細考慮對錶情表達的潛在影響是很重要的。適當的注射技術和位置可以幫助最大限度地減少對錶情表情的不必要影響，並獲得自然的效果。

除了之前討論的填充劑對下方肌肉施加壓力的理論外，重要的是要考慮另一種看似合理的機制，即當填充劑放置在肌肉表面時，填充劑會影響表面位移。大塊填充材料在肌肉與覆蓋的皮膚和軟組織之間的插入可以顯著地改變從肌肉到皮膚的收縮力傳遞的動力學。通常，肌肉收縮會直接影響上覆皮膚的張力和運動。然而，填充材料的引入創造了一個新的相互作用層。該層可以潛在地改變傳遞到皮膚的力的路徑和強度。根據其粘度和體積，填充材料可以起到緩衝墊或緩衝墊的作用，吸收一些收縮力。因此，這可能會減少肌肉收縮對皮膚表面的直接影響，從而可能改變肌肉運動的可見影響。此外，填充劑的物理性質，如彈性和壓縮性，可能在其如何調節這些力方面發揮關鍵作用。更硬的填充劑可以更直接地傳遞力，而更軟的填充劑可以將力更廣泛地擴散到整個注射部位。這種變化可能導致不同程度的表面位移和注射後皮膚外觀的變化。